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沙門氏菌血清分型是一種重要的病原微生物檢測手段,它是根據(jù)沙門氏菌菌體表面的抗原成分進(jìn)行分型,包括菌體抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)、表面包膜抗原或莢膜抗原(Vi抗原)及其菌毛抗原四種。 其中,0抗原與H抗原是進(jìn)行血清型分型的最常用的兩項(xiàng)指標(biāo),Vi抗原次之。在這個(gè)過程中,血清分型的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。準(zhǔn)確的血清分型能夠幫助我們了解特定病原體的種類和特性,從而制定有效的防控策略。
按照中心黨委“三抓三促”行動的總體要求,為培養(yǎng)建立一支高水平的檢驗(yàn)檢測隊(duì)伍,更好防控沙門氏菌感染,細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室于2023年12月26-27日開展沙門氏菌血清分型培訓(xùn),確保我科室專業(yè)技術(shù)能力得到大力提升。
傳統(tǒng)的玻片血清凝集實(shí)驗(yàn)是一種經(jīng)典的血清分型方法,但是由于其操作過程繁瑣,且需要較長的時(shí)間才能得出結(jié)果,因此在實(shí)際應(yīng)用中受到了一些限制。相比之下,多重?zé)晒釶CR血清分型檢測試劑盒利用PCR技術(shù)擴(kuò)增特定的DNA片段,然后通過熒光標(biāo)記的引物進(jìn)行雜交,從而實(shí)現(xiàn)對不同血清型的快速區(qū)分,顯著提高實(shí)驗(yàn)效率,準(zhǔn)確性也得到了廣泛認(rèn)可,對于沙門氏菌的血清分型研究有看重要的推動作用。
本次培訓(xùn)使用沙門氏菌血清(O、H)基因分型試劑盒,采用熒光PCR技術(shù),針對沙門氏菌OH因子引物和探針。其實(shí)驗(yàn)原理是:PCR擴(kuò)增過程中,與模板結(jié)合的探針被切斷,報(bào)告基團(tuán)與猝滅基團(tuán)分離,產(chǎn)生熒光信號,熒光定量PCR儀根據(jù)檢測到的熒光信號繪制出實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線,從而實(shí)現(xiàn)沙門氏菌血清型在核酸水平上的鑒定。最后根據(jù)“沙門氏菌O-H1-H2血清分型判讀表”,得到OH鑒定結(jié)果。
細(xì)菌檢驗(yàn)檢測人員不僅要具有基本的理論和專業(yè)知識,較高的操作技能,而且要具有科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)、認(rèn)真、負(fù)責(zé)的工作態(tài)度,對新技術(shù)、新方法要有主動性,提供真實(shí)有效、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)檢測數(shù)據(jù)。通過此次培訓(xùn),常見的沙門氏菌血清分型實(shí)驗(yàn)由原來傳統(tǒng)的玻片血清凝集實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)變?yōu)楦鼮榭焖俚姆椒ǎ瑢⒃拘枰獛仔r(shí)甚至更長時(shí)間才能完成的實(shí)驗(yàn)縮短至1小時(shí)30分鐘,大大節(jié)約檢測時(shí)間。(細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室)